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避免豬瘟檢測(cè)儀器出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,需要從樣本處理、儀器操作、質(zhì)量控制等多個(gè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格把控,以下是具體措施:
樣本處理環(huán)節(jié)
規(guī)范樣本采集
采集部位要準(zhǔn)確,例如檢測(cè)豬瘟?xí)r,對(duì)于血液樣本,應(yīng)選擇合適的血管進(jìn)行采血,避免因采集部位不當(dāng)導(dǎo)致樣本中病毒含量低或混入雜質(zhì)。若采集組織樣本,要選取病變明顯或病毒富集的部位,像淋巴結(jié)、脾臟等。
采集過(guò)程要嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則,防止樣本被外源微生物污染。比如使用一次性無(wú)菌采血器和容器,避免因器具不潔引入其他病原體,造成假陽(yáng)性結(jié)果。
優(yōu)化樣本保存與運(yùn)輸
樣本采集后要及時(shí)處理和保存,不同類型的樣本有不同的保存要求。如血液樣本可在抗凝后冷藏保存,組織樣本可冷凍保存。若保存不當(dāng),病毒核酸可能降解,導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
運(yùn)輸過(guò)程中要確保樣本處于適宜的溫度和環(huán)境條件。例如,使用冰袋或干冰保持低溫,防止樣本變質(zhì)。同時(shí),要避免樣本受到劇烈震動(dòng)或擠壓,以免影響檢測(cè)結(jié)果。
做好樣本前處理
對(duì)于核酸檢測(cè),要進(jìn)行核酸提取和純化,去除樣本中的蛋白質(zhì)、鹽類等雜質(zhì)。可能會(huì)抑制PCR反應(yīng),導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
在抗原抗體檢測(cè)中,要對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尯皖A(yù)處理,以提高檢測(cè)的特異性。例如,對(duì)于血清樣本,可進(jìn)行適當(dāng)?shù)碾x心和過(guò)濾,去除其中的纖維蛋白和其他大分子物質(zhì)。
儀器操作環(huán)節(jié)
正確使用儀器
操作人員要熟悉儀器的性能和操作流程,嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書進(jìn)行操作。例如,在使用熒光定量PCR儀時(shí),要準(zhǔn)確設(shè)置反應(yīng)體系、溫度循環(huán)參數(shù)等。如果參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤,可能會(huì)影響PCR反應(yīng)的效率和特異性,導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。
定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)和維護(hù),確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。比如,定期檢查儀器的光學(xué)系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)等,及時(shí)更換老化的部件。
合理選擇試劑與耗材
選用質(zhì)量可靠、經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢測(cè)試劑和耗材。不同品牌和批次的試劑可能存在性能差異,要選擇靈敏度高、特異性好的試劑。例如,在核酸檢測(cè)中,要選擇特異性強(qiáng)的引物和探針,避免與其他病原體發(fā)生交叉反應(yīng)。
注意試劑和耗材的保存條件和使用期限,過(guò)期或保存不當(dāng)?shù)脑噭┛赡軙?huì)影響檢測(cè)結(jié)果。
質(zhì)量控制環(huán)節(jié)
設(shè)置陽(yáng)性與陰性對(duì)照
在每次檢測(cè)中,都要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。陽(yáng)性對(duì)照可以驗(yàn)證檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度和有效性,陰性對(duì)照可以檢測(cè)是否存在外源污染或非特異性反應(yīng)。例如,在核酸檢測(cè)中,陽(yáng)性對(duì)照可使用已知濃度的病毒核酸標(biāo)準(zhǔn)品,陰性對(duì)照可使用無(wú)核酸酶的水。
如果陽(yáng)性對(duì)照未出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果,或陰性對(duì)照出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,說(shuō)明檢測(cè)過(guò)程可能存在問(wèn)題,需要重新進(jìn)行檢測(cè)。
進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)與結(jié)果驗(yàn)證
對(duì)于疑似陽(yáng)性或陰性的樣本,要進(jìn)行重復(fù)檢測(cè),以提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如,對(duì)同一份樣本進(jìn)行2 - 3次獨(dú)立檢測(cè),如果多次檢測(cè)結(jié)果一致,則可提高結(jié)果的可信度。
可以采用不同的檢測(cè)方法或儀器對(duì)樣本進(jìn)行驗(yàn)證。比如,先用核酸檢測(cè)方法進(jìn)行初篩,再用抗原抗體檢測(cè)方法進(jìn)行復(fù)核,以減少假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果的發(fā)生。